Efeito de extratos vegetais de Hamamelis virginiana, Persea americana, Cynara scolymus L e Stryphnodendron barbatiman Msobre a expressão fenotípica dos fatores de virulência em biofilmes de Candida albicans / Effect of Hamamelis virginiana, Persea americana, Cynara scolymus L and Stryphnodendron barbatiman M plant extracts on the phenotypic expression of virulence factors in biofilms of the Candida albicans

Objetivo: Analisar a expressão fenotípica de fatores de virulência em biofilmes de Candida albicans frente a extratos glicólicos de plantas. Material e Métodos: Os biofilmes de Candida albicans (ATCC 18804) obtidos a partir de incubação de 48 horas foram expostos por 5 minutos e 24 horas a diferentes concentrações de extratos glicólicos de Hamamelis virginiana e Persea americana, Cynara scolymus L e Stryphnodendron barbatiman M, a fim de verificar a ação antifúngica da proteinase, fosfolipase e hemolisina. Resultados: Todos os extratos foram eficazes na redução do biofilme. Em contato por 5 minutos. os extratos reduziram 50% do biofilme. Após 24 horas. o extrato de Persea americana apresentou o biofilme em 90%, seguido de Cynara scolymus, que o interrompeu em 85%. Houve mudança na intensidade da proteinase após 5 minutos e 24 horas, com uma atividade enzimática média de 0,69 em comparação com o controle de 0,49. Cynara scolymus foi o extrato com maior concentração média de 100 mg/ml; a intensidade da fosfolipase foi alterada com Stryphnodendron barbatiman sendo mais efetivo em 24 horas em relação ao controle (p< 0,0001). A secreção de hemolisina foi modificada por Hamamelis virginiana (12,5 mg/ml) após 5 minutos de exposição e em 24 horas. todos os extratos foram capazes de causar alterações na secreção. Conclusão: Os extratos testados apresentam potencial antifúngico em biofilmes de Candida albicans, implicando em redução significativa dos fatores de virulência. Assim, estes podem ser indicados como uma ferramenta terapêutica alternativa para reduzir a morbidade dessas infecções, já que em ambos os tempos de exposição investigados, eles foram capazes de reduzir a secreção enzimática do fungo (AU)

Objective: Analyze the phenotypic expression of virulence factors in Candida albicans biofilms against plant glycolicextracts. Material and Methods: The biofilms of Candida albicans (ATCC 18804) obtained from incubation for 48 hours were exposed for 5 minutes and 24 hours to different concentrations of glycolic extracts of Hamamelis virginiana and Persea americana, Cynara scolymus L and Stryphnodendron barbatiman M, in order to verify the antifungal activity of the proteinase, phospholipase and hemolysin. Results: All extracts were effective in reducing biofilm. In contact for 5 minutes. the extracts reduced 50% of the biofilm. After 24 hours, the Persea americanaextract showed the biofilm at 90%, followed by Cynara scolymus, which interrupted it at 85%, There was a change in proteinase intensity after 5 minutes and 24 hours. with an average enzymatic activity of 0.69 compared to the control of 0.49. Cynara scolymus was the extract with the highest mean concentration of 100 mg/ml; the phospholipase intensity was changed with Stryphnodendron barbatiman being more effective in 24 hours compared to the control (p< 0.0001). The hemolysin secretion was modified by Hamamelis virginiana (12.5 mg/ml) after 5 minutes of exposure, and in 24 hours. all extracts were capable to cause changes in secretion. Conclusion: The tested extracts have antifungal potential in Candida albicans biofilms, implying a significant reduction in virulence factors. Thus, these can be indicated as an alternative therapeutic tool to reduce the morbidity of these infections, as in both investigated exposure times. they were able to reduce theenzymatic secretion of the fungus (AU)

Antimicrobial action of psidium guajava l. extract against enterococcus faecalis and candida albicans strains: a pilot study / Ação antimicrobiana do extrato de psidium guajava l. contra as cepas de enterococcus faecalis e candida albicans: um estudo piloto / Acción antimicrobiana de la extracción de psidium guajava l. contra los cepes de los enterococcus faecalis y los candida albicans: un estudio piloto

Endodontic treatment consists of decontamination of the root canal using irrigants like Sodium Hypochlorite (NaOCl). However, some microorganisms resist conventional therapies, causing relapse and secondary infections. Substances with microbicidal power and potential to become new irrigants need to be studied. Thus, the objective of the present study was to evaluate the antimicrobial potential of Psidium guajava L. (guava tree) extract against clinical and standard (ATCC) strains of Enterococcus faecalis and Candida albicans. For this purpose, the extract was produced from the raw material (leaves and shoots) diluted in the hydroethanolic vehicle (EtOH: H2O / 50:50) for subsequent microbiological analysis. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Microbicidal Concentration (MMC) of the plant extract were tested, according to the Clinical and laboratory standards institute (CLSI) guidelines, on four strains: E. faecalis (ATCC and clinic) and C. albicans (ATCC and clinic). The extract of P. guajava did not produce antifungal action on C. albicans, however, it showed microbicidal potential against strains of E. faecalis, showing MIC of 0.20%. This concentration was lower than the MIC of NaOCl which was 0.31%, a solution that is commonly used in dental clinics. In conclusion, the hydroethanolic extract of P. guajava presents bactericidal action against E. faecalis, being a natural product with potential for future studies regarding the development of new endodontic irrigants.

O tratamento endodôntico consiste na descontaminação do canal radicular com emprego de soluções irrigadoras, como por exemplo, o Hipoclorito de Sódio (NaOCl). Contudo, alguns microrganismos resistem as terapias convencionais, causando recidiva e infecções secundárias. Substâncias com poder microbicida e potencial para se tornarem novas soluções irrigadoras precisam ser estudadas. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial antimicrobiano do extrato de Psidium guajava L. (goiabeira) contra cepas clínicas e padrão (ATCC) de Enterococcus faecalis e Candida albicans. Para tanto, o extrato foi produzido a partir da matéria bruta (folhas e brotos) diluído no veículo hidroetanólico (EtOH: H2O / 50:50) para posterior análise microbiológica. Foram testadas a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Microbicida Miníma (CMM) do extrato vegetal, de acordo com as normas da Clinical and laboratory standards institute (CLSI), sobre quatro cepas: E. faecalis (ATCC e clínica) e C. albicans (ATCC e clínica). O extrato de P. guajava não produziu ação antifúngica sobre C. albicans, contudo, apresentou potencial microbicida contra cepas de E. faecalis, exibindo CIM de 0,20%. Esta concentração foi menor que a CIM do NaOCl que foi de 0,31%, uma solução que é comumente utilizada nas clínicas odontológicas. Em conclusão, o extrato hidroetanólico de P. guajava apresenta ação bactericida contra E. faecalis, sendo um produto natural com potencial para futuros estudos quanto ao desenvolvimento de novos irrigantes endodônticos.

El tratamiento endotónico consiste en la descontaminación del canal raíz con el uso de soluciones de irrigación, como el Hipoclorito de Sodio (NaOCl). Sin embargo, algunos microorganismos se resisten a las terapias convencionales, causando recaídas e infecciones secundarias. Es necesario estudiar las sustancias con poder de microbicida y el potencial para convertirse en nuevas soluciones de riego. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar el potencial antimicrobiano del extracto de Psidium guajava L. (guava) frente a cepas clínicas y estándar (ATCC) de Enterococcus faecalis y Candida albicans. Con este fin, el extracto se produjo a partir de la materia prima (hojas y brotes) diluida en el vehículo hidroetanólico (EtOH: H2O / 50:50) para análisis microbiológicos posteriores. La Concentración Mínima Inhibidora (CMI) y la Concentración de Microbicidas Minima (CCM) del extracto vegetal se probaron de acuerdo con el Clinical and laboratory standards institute (CLSI) en cuatro cepas: E. faecalis (ATCC y clínico) y C. albicans (ATCC y clínico). El extracto de P. guajava no produjo acción antifúngica sobre C. albicans, sin embargo mostró potencial microbicida frente a cepas de E. faecalis, presentando CIM 0,20%. Esta concentración fue menor que la CMI de NaOCl, que fue del 0,31%, una solución comúnmente utilizada en clínicas dentales. En conclusión, el extracto hidroetanólico de P. guajava muestra una acción bactericida frente a E. faecalis, siendo un producto natural con potencial para futuros estudios sobre el desarrollo de nuevos irrigantes endotónicos.

Detoxification of LTA by intracanal medication: analysis by macrophages proinflammatory cytokines production

Abstract The aim of this study was to evaluate in vitro the effect of calcium hydroxide [Ca(OH)2], 2% chlorhexidine gel (CHX) on macrophages (RAW 264.7) to produce pro-inflammatory cytokines and nitric oxide after pretreatment with lipoteichoic acid (LTA) of Enterococcus faecalis. Forty-eight human single-rooted teeth were instrumented with R25.08 (RECIPROC) and sterilized by gamma irradiation. LTA was inoculated in the root canal of each specimen for 96 hours. Specimens were instrumented with 40.06 and 50.05 (RECIPROC) and medicated with: I) Pyrogen-free saline solution (SS); II) 2% CHX gel; III) Ca(OH)2 + SS; or IV) Ca(OH)2 + CHX for 14 days. Three samples (S) were performed of the root canal of each specimen at: S1) immediately after instrumentation; S2) after Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA); S3) after intracanal medication removal. Subsequent quantification of cytokines (IL-1β, TNF-α, MIP-1α, IP-10, G-CSF and IL-6) by immunosorbent assay (ELISA) and nitric oxide by the Griess method was carried-out. Data were submitted to a normality test and then analyzed with one-way ANOVA and Tukey test with a significance level of 5% using GraphPad Prism 6. Ca(OH)2 + SS and Ca(OH)2 + CHX presented lower levels of TNF-α, TNF-α, IL-6, G-CSF and nitric oxide. Ca(OH)2 + SS was the most effective in reducing MIP-1α. CHX was effective in reducing IL-6 and G-CSF. Therefore, the combined intracanal medication of calcium hydroxide and chlorhexidine is effective in reducing the cytokines TNF-α, IL-1β, IL-6, G-CSF and nitric oxide.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro o efeito do hidróxido de cálcio [Ca(OH)2], clorexidina gel a 2% (CHX) em macrófagos (RAW 264.7) na produção de citocinas pró-inflamatórias e óxido nítrico após pré-tratamento com ácido lipoteicóico (LTA) de Enterococcus faecalis. Quarenta e oito dentes humanos uniradiculares foram instrumentados com R25.08 (RECIPROC) e esterilizados por irradiação gama. LTA foi inoculado no canal radicular de cada espécime por 96 horas. Os espécimes foram instrumentados com 40.06 e 50.05 (RECIPROC) e medicados com: I) solução salina apirogênica (SS); II) CHX 2%; III) Ca(OH)2 + SS; ou IV) Ca(OH)2 + CHX durante 14 dias. Três amostras (S) foram realizadas do canal radicular de cada espécime em: S1) imediatamente após a instrumentação; S2) após ácido etilenodiaminotetracético (EDTA); S3) após a retirada da medicação intracanal. Foi realizada a quantificação subsequente de citocinas (IL-1β, TNF-α, MIP-1α, IP-10, G-CSF e IL-6) por imunoensaio (ELISA) e de óxido nítrico pelo método de Griess. Os dados foram submetidos a um teste de normalidade e então analisados com ANOVA one-way e teste de Tukey com nível de significância de 5% usando GraphPad Prism 6. Ca(OH)2 + SS e Ca(OH)2 + CHX apresentaram níveis mais baixos de TNF -α, TNF-α, IL-6, G-CSF e óxido nítrico. Ca(OH)2 + SS foi o mais eficaz na redução de MIP-1α. CHX foi eficaz na redução de IL-6 e G-CSF. Sendo assim a associação de hidróxido de cálcio e clorexidina é eficaz na redução das citocinas TNF-α, IL-1β, IL-6, G-CSF e óxido nítrico.

Punica granatum L. Extract Antibiofilm Action against Acinetobacter baumannii Carbapenem-Resistant and Biocompatibility over Human Keratinocytes / Ação Antibiofime de Extrato dePunica granatum L Contra Acinetobacter baumannii Resistente a Carbapnêmicos e Biocompatibilidade em Queratinócitos Humanos

Acinetobacter baumannii is a multi-drug resistant microorganism. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial and antibiofilm action of the pomegranate natural extract against eight strains of multidrug resistant Acinetobacter baumanii and to assess the extract cytotoxicity in a culture of Human Keratinocytes (HaCat). Broth microdilution method was used to determine the minimum inhibitory and minimum microbicidal concentrations of the extracts. The extract antibiofilm action was analysed by the MTT colorimetric test. The cytotoxicity evaluation was performed by the MTT colorimetric test, which analysed the mitochondrial cellular action, after contact of the extract for 5 min. The results were statistically analysed by ANOVA and Tukey test with a significance level α≤ 0.05. Punica granatum L. (pomegranate) extract had antimicrobial action on all the 8 clinical strains of Acinetobacter baumannii evaluated. The extract showed a significant reduction in metabolic action in biofilm for all the strains, with results statistically different from growth control (p≤0.05%). P. granatum extract applied for 5 min on human keratinocytes (HaCat) promoted cell viability in all the tested concentrations. The pomegranate extract is effective in reducing the multidrug-resistant clinical strains of Acinetobacter baumanni and is biocompatible. (AU)

Acinetobacter baumannii é um microrganismo multirresistente. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação antimicrobiana e antibiofilme do extrato natural de romã contra oito cepas de A. baumanii multirresistente e avaliar a citotoxicidade do extrato em uma cultura de queratinócitos humanos (HaCat). O método de microdiluição em caldo foi utilizado para determinar as concentrações inibitórias mínimas e microbicidas mínimas dos extratos. A ação antibiofilme do extrato foi analisada pelo teste colorimétrico MTT. A avaliação da citotoxicidade foi realizada pelo teste colorimétrico MTT, que analisou a ação celular mitocondrial, após contato do extrato por 5 min. Os resultados foram analisados ​​estatisticamente por ANOVA e teste de Tukey com nível de significância α≤ 0,05. O extrato de Punica granatum L. (romã) apresentou ação antimicrobiana em todas as 8 cepas clínicas avaliadas de A. baumannii. O extrato apresentou redução significativa na ação metabólica no biofilme para todas as linhagens, com resultados estatisticamente diferentes do controle de crescimento (p≤0,05%). O extrato de P. granatum aplicado por 5 min em queratinócitos humanos (HaCat) promoveu viabilidade celular em todas as concentrações testadas. O extrato de romã é eficaz na redução das cepas clínicas multirresistentes de Acinetobacter baumanni e é biocompatível. (AU)

Schinus terebinthifolius (Brazilian Peppertree) extract used as antifungal to control Candida spp. in planktonic cultures and biofilms / Extrato de Schinus terebinthifolius (pimenta rosa) utilizado como antifúngico para controlar Candida spp. em culturas planctônicas e biofilmes

Objective: The use of medicinal plants may be an alternative method for the control of Candida spp. Responsible for human infections. This study evaluated the antifungal effect of Schinus terebinthifolius extract (Brazilian Peppertree) on C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, and C. krusei planktonic cultures and bio films. Material and Methods: Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungal concentration (MFC) of the plant extract were determined by the broth microdilution method. Biofilms formed in microplate wells were exposed to the extract for 5 min (50, 100 and 200 mg/mL) or 24 h (25, 50 and 100 mg/mL). After determination of colony-forming units per milliliter (CFU/mL), the data were analyzed by one-way ANOVA and Tukey's Test (P ≤ 0.05). Results: Different MIC (mg/mL) were found, such as 0.39 (C. dubliniensis), 1.56 (C. albicans), and 3.13 (C. glabrata and C. krusei). Besides, MFC (mg/mL) of 0.78 (C. dubliniensis) and 3.13 (C. albicans, C. glabrata and C. krusei) were also observed. Regarding the biofilms, significant reductions (log10) were found after 5 min and 24 h exposure to the plant extract, compared to the control group. However, C. dubliniensis was significantly affected only in 24 h treatment. Conclusion: S. terebinthifolius extract presented a significant antifungal effect on C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, and C. Krusei both in planktonic cultures and biofilms (AU)

Objetivo: O uso de plantas medicinais pode ser um método alternativo para o controle de Candida spp. responsáveis por infecções humanas. Este estudo avaliou o efeito antifúngico do extrato de Schinus terebinthifolius (pimenta rosa) sobre culturas planctônicas e biofilmes de C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata e C. krusei. Material e Métodos: Concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM) do extrato vegetal foram determinadas pelo método de micro diluição em caldo. Biofilmes formados em poços de microplacas foram expostos ao extrato por 5 min (50, 100 e 200 mg/mL) ou 24 h (25, 50 e 100 mg/mL). Após determinação de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL), os dados foram analisados por one-way ANOVA e Teste de Tukey (P ≤ 0,05). Resultados: Foram encontradas diferentes CIM (mg/mL), como 0,39 (C. dubliniensis),1,56 (C. albicans) e 3,13 (C. glabrata e C. krusei). Além disso, CFM (mg/mL) de 0,78 (C. dubliniensis) e 3,13 (C. albicans, C. glabrata e C. krusei) também foram observadas. Em relação aos biofilmes, foram encontradas reduções significativas (log10) após 5 min e 24 h de exposição ao extrato vegetal, em comparação ao grupo controle. No entanto, C. dubliniensis foi significativamente afetada apenas no tratamento de 24 h. Conclusão: O extrato de S. terebinthifolius apresentou efeito antifúngico significativo sobre C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata e C. Krusei, tanto em culturas planctônicas quanto em biofilmes. (AU)

Microbial profile and endotoxin levels in primary periodontal lesions with secondary endodontic involvement

Abstract This study was carried out to investigate the microbial profile and endotoxin levels of endodontic-periodontal lesions of periodontal origin. Periodontal and endodontic samples were taken from periodontal pockets and necrotic root canals of 10 teeth with endodontic-periodontal lesions. Evidencing of 40 different bacterial species were determined in each endodontic and periodontal sample using the checkerboard DNA-DNA hybridization method and Kinetic chromogenic LAL assay was used for quantification of endotoxins. Fisher's exact test correlated the bacterial species with the endodontic or periodontal microbiota. The endotoxin levels (EU/mL) found in samples of the root canal and periodontal pocket were compared by the Wilcoxon test (p<0.05). Bacteria and LPS units were found in 100% of the endodontic and periodontal samples. The species E. faecium, P. acnes, G. morbillorum, C. sputigena and L. buccalis were strongly correlated with the endodontic microbiota and P. nigrescens with the periodontal microbiota. P. intermedia, P. endodontalis and V. parvula were more prevalent in both endodontic and periodontal microbiots. The endotoxin levels in the periodontal pocket (89600 EU/mL) were significantly higher than in the root canal (2310 EU/mL). It was concluded that the microbiota present in the periodontal and endodontic tissues is similar, with a higher prevalence of species of the orange complex and a higher level of endotoxin in the periodontal pockets.

Resumo Este estudo foi realizado para investigar o perfil microbiano e os níveis de endotoxina de lesões endoperiodontais de origem periodontal. Amostras periodontais e endodônticas foram obtidas de bolsas periodontais e canais radiculares necróticos de 10 dentes com lesões endoperiodontais. A investigação de 40 espécies bacterianas diferentes foram determinadas em cada amostra endodôntica e periodontal usando o método de hibridização de DNA-DNA (checkerboard) e o ensaio cinético cromogênico LAL foi usado para quantificação de endotoxinas. O teste exato de Fisher correlacionou as espécies bacterianas com a microbiota endodôntica ou periodontal. Os níveis de endotoxina (EU/mL) encontrados nas amostras do canal radicular e na bolsa periodontal foram comparados pelo teste de Wilcoxon (p<0,05). Bactérias e unidades de LPS foram encontradas em 100% das amostras endodônticas e periodontais. As espécies E. faecium, P. acnes, G. morbillorum, C. sputigena e L. buccalis foram fortemente correlacionadas com a microbiota endodôntica e P. nigrescens com a microbiota periodontal. P. intermedia, P. endodontalis e V. parvula foram mais prevalentes em ambas microbiotas endodôntica e periodontal. Os níveis de endotoxina na bolsa periodontal (89600 EU/mL) foram significativamente maiores do que no canal radicular (2310 EU/mL). Concluiu-se que a microbiota presente nos tecidos periodontal e endodôntico é semelhante, com maior prevalência de espécies do complexo laranja e maior nível de endotoxina nas bolsas periodontais.

Total protein level reduction of odontopathogens biofilms by Rosmarinus officinalis L. (rosemary) extract: an analysis on Candida albicans and Streptococcus mutans / Redução do nível de proteína total de biofilmes de odontopatógenos por extrato de Rosmarinus officinalis L. (alecrim): uma análise sobre Candida albicans e Streptococcus mutans

Objective: The resistance of fungi and bacteria to the available antimicrobials has increased and the development of alternative products to control them has become a very requirement. The use of plant products could be a viable option due to the efficacy, viability, and availability they present. Thereby, this study evaluated the effect of R. officinalis L. extract on C. albicans and S. mutans biofilms, by the total protein level analysis presented by the microorganisms. Material and Methods: For this purpose, monomicrobial biofilms were formed for 48 h and exposed to the R. officinalis L. extract for 5 min. Then, total protein quantification was performed by Lowry method. Results: The analysis showed significant total protein reduction of the biofilms after exposure to the plant extract, with 39 ± 11%, for C. albicans, and 32 ± 11%, for S. mutans. Conclusion: R. officinalis L. extract decreased the total protein level in both biofilms. Thus, C. albicans and S. mutans protein composition could be a target for action of antimicrobial agents. (AU)

Objetivo: A resistência de fungos e bactérias aos antimicrobianos disponíveis tem se elevado e o desenvolvimento de produtos alternativos para controlar micróbios tem se tornado uma necessidade real. A utilização de produtos de origem vegetal poderia ser uma opção viável, devido à eficácia, viabilidade e disponibilidade que apresentam. Sendo assim, este estudo avaliou o efeito do extrato de R. officinalis L. (alecrim) sobre biofilmes de C. albicans and S. mutans, analisando o nível de proteína total apresentada pelos micro-organismos. Material e Métodos: Para tanto, biofilmes monomicrobianos foram formados por 48 h e expostos ao extrato de R. officinalis L. por 5 min. Então, a quantificação de proteína total foi realizada por método de Lowry. Resultados: A análise demonstrou reduções significativas de proteína total de cada biofilme após exposição ao extrato, sendo 39 ± 11% no biofilme de C. albicans e 32 ± 11%, no caso de S. mutans. Conclusão: O extrato de R. officinalis L. diminuiu o nível de proteína total em ambos os biofilmes. Com isso, a composição proteica de C. albicans e S. mutans poderia ser um alvo para ação de agentes antimicrobianos. (AU)

Strategies to optimize MEDLINE and EMBASE search strategies for anesthesiology systematic reviews. An experimental study

ABSTRACT BACKGROUND: A high-quality electronic search is essential for ensuring accuracy and comprehensiveness among the records retrieved when conducting systematic reviews. Therefore, we aimed to identify the most efficient method for searching in both MEDLINE (through PubMed) and EMBASE, covering search terms with variant spellings, direct and indirect orders, and associations with MeSH and EMTREE terms (or lack thereof). DESIGN AND SETTING: Experimental study. UNESP, Brazil. METHODS: We selected and analyzed 37 search strategies that had specifically been developed for the field of anesthesiology. These search strategies were adapted in order to cover all potentially relevant search terms, with regard to variant spellings and direct and indirect orders, in the most efficient manner. RESULTS: When the strategies included variant spellings and direct and indirect orders, these adapted versions of the search strategies selected retrieved the same number of search results in MEDLINE (mean of 61.3%) and a higher number in EMBASE (mean of 63.9%) in the sample analyzed. The numbers of results retrieved through the searches analyzed here were not identical with and without associated use of MeSH and EMTREE terms. However, association of these terms from both controlled vocabularies retrieved a larger number of records than did the use of either one of them. CONCLUSIONS: In view of these results, we recommend that the search terms used should include both preferred and non-preferred terms (i.e. variant spellings and direct/indirect order of the same term) and associated MeSH and EMTREE terms, in order to develop highly-sensitive search strategies for systematic reviews.

Are Desensitizing Toothpastes Equally Biocompatible and Effective Against Microorganisms?

Abstract The aims of this study were evaluate cytotoxicity, genotoxicity, antimicrobial activity of desensitizing toothpastes compared to a common one and the surface roughness of tooth enamel submitted to brushing with these toothpastes. Samples of three desensitizing toothpastes (Colgate Sensitive, Sensodyne and Oral B Sensitive) and common toothpaste (Colgate) were placed in contact with gingival human fibroblasts. Cytotoxicity and genotoxocity were measured by MTT assay and micronucleus test. Antimicrobial activity of the toothpastes extracts against C. albicans, S. mutans and S. aureus were assessed. For surface roughness evaluation, bovine teeth were submitted to 10.000 brushing cycles. The results were analyzed statically using Mann-Whitney U, ANOVA and Z tests (p<0.05). All toothpastes caused cytotoxic effect to the cells (p<0.05), except Colgate Sensitive. The toothpastes did not increase the number of micronuclei compared to the untreated control group. Colgate eliminated all the evaluated microorganisms at lower concentrations compared to Colgate Sensitive and Oral B Sensitive, which were not able to eliminate S. aureus. Sensodyne did not reach the minimum microbicidal concentration. The surface roughness of tooth enamel increased after brushing with Colgate Sensitive and Oral B Sensitive, however the comparison between groups showed no difference on the enamel surface roughness presented by desensitizing toothpastes when compared with the common one (p>0.05). Based on these results, we can conclude that although none toothpaste has induced genotoxicity, Colgate Sensitive was also not cytotoxic. Colgate was the most effective against the microorganisms, and there were no differences on the enamel surface roughness between the groups.

Resumo Os objetivos desse estudo foram avaliar a citotoxicidade, genotoxicidade, atividade antimicrobiana de dentifrícios dessensibilizantes em comparação com um comum e também a rugosidade superficial do esmalte dentário submetido à escovação com esses dentifrícios. Amostras de três dentifrícios dessensibilizantes (Colgate Sensitive, Sensodyne e Oral B Sensitive) e um dentifrício comum (Colgate) foram colocadas em contato com fibroblastos gengivais humanos e a citotoxicidade e genotoxidade foram mensuradas pelo ensaio MTT e teste do micronúcleo. A atividade antimicrobiana dos extratos dos dentifrícios contra C. albicans, S. mutans e S. aureus foi determinada. Para a avaliação da rugosidade superficial, espécimes de dentes bovinos foram submetidas à 10.000 ciclos de escovação. Os resultados foram analisados estatisticamente usando os testes Mann-Whitney U, ANOVA e Teste Z (P<0,05). Todos os dentifrícios causaram efeito citotóxico às células (P<0,05), exceto o Colgate Sensitive. Os dentifrícios não aumentaram o número de micronúcleos em comparação com o grupo não tratado. O Colgate foi capaz de eliminar todos os microorganismos avaliados em concentrações mais baixas em comparação com Colgate Sensitive e Oral B Sensitive, que não foram capazes de eliminar os S. aureus. O Sensodyne não atingiu a concentração microbicida mínima para qualquer microorganismo. A rugosidade superficial do esmalte dentário aumentou após a escovação com Colgate Sensitive e Oral B Sensitive, porém a comparação entre os grupos não mostrou diferença na rugosidade superficial do esmalte apresentada por dentifrícios dessensibilizantes quando comparados ao comum (p>0,05). Com base nesses resultados, podemos concluir que, embora nenhum dentifrício tenha induzido genotoxicidade, o Colgate Sensitive também não foi citotóxico. O Colgate foi o mais eficaz contra os microorganismos, e não houve diferença na rugosidade superficial do esmalte entre os grupos.

Prevalence and Sensitivity of Bacilli and Pseudomonas in the Newborn's Oral Cavity

Abstract The aim of this study was to isolate Enterobacteria and Pseudomonas from the oral cavity of hospitalized newborns (NB) and determine their prevalence and the sensitivity profile to most commonly used antibiotics for this age group. Samples from the oral cavity of NB from 24 to 48 h age were collected using swabs. The samples were inoculated on MacConkey agar, incubated and the colonies counted and identified. For each strain, the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined using agar dilution test. Tests for enterobacteria producing extended spectrumβ-lactamases (ESBL) were performed using agar diffusion. Descriptive statistics was used for data analysis. Two of the isolated strains were submitted to the susceptibility test in biofilm. Of the collected samples, 8% presented Enterobacteria (mean of 6,141 CFU/mL) and no Pseudomona species was isolated. Positive samples were from NB in accommodation set or in the NB nursery. Enterobacter was the most prevalent genus and some strains were resistant to ampicillin, gentamicin and cephalothin. No ESBL strain was detected. Microorganisms in biofilms were resistant to all antibiotics, with concentrations four times higher than MIC. The presence of enterobacteria in the oral cavity of newborns, especially some strains resistant to normally used antibiotics, warns to the need for care to avoid the early colonization of this niche and the occurrence of a possible hospital infection in this age group.

Resumo O objetivo foi isolar enterobactérias e Pseudomonas da cavidade oral de recém-nascidos hospitalizados (RN) e determinar a prevalência e o perfil de sensibilidade aos antibióticos mais comumente utilizados para este grupo etário. Foram coletadas amostras da cavidade oral de NB com idade de 24-48 horas, usando swab. As amostras foram inoculadas em ágar MacConkey, incubadas e, as colônias contadas e identificadas. Para cada cepa, a concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada utilizando teste de ágar diluição. Testes para enterobactérias produtoras de b-lactamases de espectro estendido (ESBL) foram realizados utilizando difusão em ágar. Estatística descritiva foi utilizada para análise dos resultados. Duas das cepas isoladas foram submetidas ao teste de susceptibilidade em biofilme. Das amostras coletadas, 8% apresentaram enterobactérias (média de 6,141 UFC / ml) e nenhuma espécie de Pseudomonas foi isolada. As amostras positivas foram de RN de alojamento conjunto ou RN de berçário. Enterobacter foi o gênero mais prevalente e algumas cepas foram resistentes à ampicilina gentamicina e cefalotina. Não foi detectada cepa ESBL. Micro-organismos em biofilme foram resistentes a todos os antibióticos, em concentrações quatro vezes superiores ao MIC. A presença de enterobactérias em cavidade oral de recém-nascidos, especialmente algumas cepas resistentes aos antibióticos normalmente utilizados, alerta para a necessidade de cuidados, evitando a colonização precoce deste nicho e a ocorrência de possível infecção nosocomial neste grupo etário.

Extrato de Rosmarinus Officinalis l. (Alecrim) reduz a viabilidade de biofilmes de interesse para saúde bucal / Rosmarinus officinalis l. (Rosemary) extract decreases the biofilms viability of oral health interest

Objetivo: No presente estudo foi avaliado o efeito do extrato de alecrim sobre a viabilidade de biofilmes monomicrobianos de Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa, bem como, sobre biofilmes polimicrobianos de C. albicans associada com S. aureus, E. faecalis, S. mutans ou P. aeruginosa. Material e métodos: Em placa de microtitulação foram formados os biofilmes mono e polimicrobianos por 48 h. Em seguida, foram expostos por 5 min ao extrato de alecrim (200 mg/mL). Solução salina (NaCl 0,9%) foi utilizada como controle. Após, foram realizadas lavagens com salina para remoção de células não aderidas. Para verificação da viabilidade dos biofilmes, após o tratamento, foi aplicado o teste colorimétrico MTT. A absorbância dos poços foi lida em espectrofotômetro de microplacas (570 nm) e os dados foram convertidos em percentual de redução e analisados estatisticamente por ANOVA e Tukey Test (P ≤ 0,05). Resultados: Após aplicação do extrato de alecrim, com exceção do biofilme de E. faecalis, foram observadas reduções significativas da viabilidade dos biofilmes monomicrobianos e polimicrobianos. Conclusão: Biofilmes monomicrobianos de C. albicans, S. aureus, S. mutans e P. aeruginosa, foram afetados pelo extrato de alecrim, bem como, os biofilmes polimicrobianos de C. albicans associada com S. aureus, E. faecalis, S. mutans ou P. aeruginosa em biofilmes polimicrobianos, apresentando significativas reduções de viabilidade.(AU)

Objective: This study evaluated the effect of rosemary extract on Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa monomicrobial biofilms viability, as well as on C. albicans associated with S. aureus, E. faecalis, S. mutans or P. aeruginosa in polymicrobial biofilms. Material and Methods: In microtiter plate, mono- and polymicrobial biofilms for 48 h were formed. Then, they were exposed for 5 min to rosemary extract (200 mg/mL). Saline (0.9% NaCl) was used as control. After, washes were done with saline to remove the non-adhered cells. Biofilm viability was checked by MTT colorimetric assay, after treatment. Absorbance of the wells was read in microplate spectrophotometer (570 nm) and data were converted to reduction percentage and statistically analyzed by ANOVA and Tukey test (P ≤ 0.05). Results: After application of rosemary extract, with exception of the E. faecalis biofilm, significant reductions in mono- and polymicrobial biofilms viability were observed. Conclusion: C. albicans, S. aureus, S. mutans and P. aeruginosa monomicrobial biofilms were affected by rosemary extract, as well as C. albicans associated with S. aureus, E. faecalis, S. mutans or P. aeruginosa in polymicrobial biofilms, presenting significant viability reductions. (AU)

Limewater and Polymyxin B Associated with NaOCl for Endotoxin Detoxification in Root Canal with Necrotic Pulp

Abstract This clinical study investigated the effects of endodontic treatment by using different irrigants (limewater + NaOCl and polymyxin B + NaOCl) and intracanal medication on endotoxins in teeth with primary endodontic infection and radiographically visible apical periodontitis. Thirty-three teeth with necrotic pulp and periapical lesions from different patients were selected for this study. Samples were collected after the coronal opening (S1) and after instrumentation (S2). Root canals were divided in 3 groups (n = 11) according to the irrigant combination used: NaOCl + LW: 2.5% NaOCl + calcium hydroxide solution (0.14%, limewater); NaOCl + PmB: 2.5% NaOCl + 10.000 UI/mL polymyxin B; 2.5% NaOCl (control). The third sampling (S3) was performed after ethylenediaminetetraacetic acid and the fourth (S4) after samples got 14 days with intracanal medication with 2% chlorhexidine gel + calcium hydroxide. Endotoxins (lipopolysaccharide) were quantified by chromogenic Limulus amebocyte lysate (LAL). Endotoxins were detected in all root canals after the coronal opening (S1). NaOCl + PmB group presented the greatest endotoxin reduction after instrumentation (76.17%), similar to NaOCl + LW group (67.64%, p<0.05) and different from NaOCl group (42.17%, p<0.05). After intracanal medication period (S4), there was significant increase of endotoxins neutralization. It was concluded that NaOCl + PmB promoted the greatest reduction of endotoxin levels, followed by NaOCl + LW. Intracanal medications had no significant complementary role in the reduction of endotoxins at the end of the treatment

Resumo Este estudo clínico investigou os efeitos do tratamento endodôntico com uso de diferentes irrigantes (NaOCl + água de cal e NaOCl + polimixina B) e medicação intracanal sobre endotoxinas em dentes com infecção endodôntica primária e presença de lesão periapical visível radiograficamente. Foram selecionados para o estudo trinta e três dentes de pacientes que apresentavam necrose pulpar e presença de lesão periapical. As amostras foram coletadas após a abertura coronária (S1) e após a instrumentação (S2). Os canais radiculares foram divididos em 3 grupos (n = 11) de acordo com a combinação de irrigantes utilizada: NaOCl + LW:- hipoclorito de sódio 2,5% + solução de hidróxido de cálcio (água de cal 0,14%); NaOCl + PmB: hipoclorito de sódio a 2,5% + polimixina B 10.000 UI/mL; NaOCl (controle): hipoclorito de sódio a 2,5%. A terceira coleta (S3) foi realizada após aplicação do ácido etilenodiamino tetra acético (EDTA) e a quarta coleta (S4) após 14 dias de medicação intracanal de hidróxido de cálcio + clorexidina gel 2%. Endotoxinas (lipopolissacarídeos) foram quantificadas pelo ensaio cromogênico do lisado de amebócitos de Limulus (LAL). Endotoxinas foram detectadas em todos os canais radiculares após abertura coronária (S1). Grupo NaOCl + PmB apresentou a maior redução de endotoxinas após a instrumentação (76,17%), sendo similar ao grupo NaOCl + LW (67,64%, P >.05) e diferente do grupo NaOCl (42,17%, P <.05). Após o período de medicação intracanal, houve aumento significativo da neutralização de endotoxinas. Concluiu-se que NaOCl + PmB promoveu a maior redução dos níveis de endotoxinas, seguido de NaOCl + LW. A medicação intracanal não teve um papel complementar significativo na redução de endotoxinas no final do tratamento.

Morphological and chemical changes of dentin after applying different sterilization methods / Avaliação das alterações morfológicas e químicas da dentina após a aplicação de diferentes métodos de esterilização

Aim: The present study evaluated the morphological and chemical changes of dentin produced by different sterilization methods, using scanning electron microscopy (SEM) and energy-dispersive X-ray spectrometry (EDS) analysis. Material and method: Five human teeth were sectioned into 4 samples, each divided into 3 specimens. The specimens were separated into sterilization groups, as follows: wet heat under pressure; cobalt 60 gamma radiation; and control (without sterilization). After sterilization, the 60 specimens were analyzed by SEM under 3 magnifications: 1500X, 5000X, and 10000X. The images were analyzed by 3 calibrated examiners, who assigned scores according to the changes observed in the dentinal tubules: 0 = no morphological change; 1, 2 and 3 = slight, medium and complete obliteration of the dentinal tubules. The chemical composition of dentin was assessed by EDS, with 15 kV incidence and 1  µm penetration. Result: The data obtained were submitted to the statistical tests of Kruskall-Wallis and ANOVA. It was observed that both sterilization methods – with autoclave and with cobalt 60 gamma radiation - produced no significant changes to the morphology of the dentinal tubules or to the chemical composition of dentin. Conclusion: Both methods may thus be used to sterilize teeth for research conducted in vitro. .

Objetivo: O presente estudo teve como objetivo avaliar as alterações morfológicas e químicas na dentina geradas por diferentes métodos de esterilização, através de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e da análise por espectrometria de energia dispersiva de raios-X. Material e método: Seccionaram-se 5 dentes humanos em 4 amostras, as quais foram divididas em 3 espécimes cada, totalizando 60 espécimes. Os espécimes foram separados conforme os grupos de esterilização: calor úmido sob pressão; radiação gama cobalto 60; controle (sem esterilização). Após a esterilização, os 60 espécimes foram analisados por MEV, usando 3 aumentos: 1500X, 5000X, 10000X. As imagens foram analisadas por 3 examinadores previamente calibrados, que distribuíram escores referentes às alterações observadas nos túbulos dentinários: 0 = sem alteração morfológica, 1 = baixa obliteração dos túbulos dentinários, 2 = moderada obliteração, 3 = completa obliteração. A composição química da dentina foi avaliada por meio do processo EDS, com 15 kV de incidência e penetração de 1 µm. Os dados obtidos foram submetidos ao teste estatístico de Kruskall-Wallis com nível de significância de 5%. Resultado: De acordo com os resultados obtidos, verificou-se que a esterilização tanto por autoclave quanto por radiação gama cobalto 60 não provocou alterações significativas na morfologia dos túbulos dentinários e na constituição química da dentina. Conclusão: Concluiu-se que ambos os métodos podem ser utilizados para a esterilização de dentes em pesquisa in vitro. .

Candida spp. adherence to oral epithelial cells and levels of IgA in children with orthodontic appliances

Adhesion and colonization of the oral cavity by Candida albicans is an initial step in candidosis. Orthodontic and other oral appliances seem to favor candidal presence. The aim of this work was to compare the presence of Candida species in saliva, their adherence to oral epithelial cells, and the levels of anti-C. albicans IgA in children with or without orthodontic appliances. This study included 30 children 5 to 12 years old (9.1 ± 1.7 years old) who were users of removable orthodontic devices for at least 6 months and 30 control children of similar ages (7.7 ± 1.5 years old). The presence of yeast species in the saliva was evaluated by microbiological methods. Candida species were identified using phenotypic methods. Anti-C. albicans IgA levels in saliva were analyzed by ELISA. The yeasts adhering to oral epithelial cells were assessed by exfoliative cytology. No statistically significant differences were observed for saliva yeast counts and anti-C. albicans IgA levels between the studied groups. Children with orthodontic devices exhibited more yeast cells adhering to oral epithelial cells and a higher percentage of non-albicans species relative to the control group. In conclusion, orthodontic appliances may favor the adherence of Candida to epithelial cells but do not influence the presence of these yeasts in saliva, and the levels of anti-C. albicans IgA do not correlate with yeast adherence or presence of Candida in the oral cavity.

In vitro antimicrobial activity of auxiliary chemical substances and natural extracts on Candida albicans and Enterococcus faecalis in root canals

ABSTRACT Objective: The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of auxiliary chemical substances and natural extracts on Candida albicans and Enterococcus faecalis inoculated in root canals. Material and Methods: Seventy-two human tooth roots were contaminated with C. albicans and E. faecalis for 21 days. The groups were divided according to the auxiliary chemical substance into: G1) 2.5% sodium hypochlorite (NaOCl), G2) 2% chlorhexidine gel (CHX), G3) castor oil, G4) glycolic Aloe vera extract, G5) glycolic ginger extract, and G6) sterile saline (control). The samples of the root canal were collected at different intervals: confirmation collection, at 21 days after contamination; 1st collection, after instrumentation; and 2nd collection, seven days after instrumentation. Microbiological samples were grown in culture medium and incubated at 37°C for 48 hours. Results: The results were submitted to the Kruskal-Wallis and Dunn (5%) statistical tests. NaOCl and CHX completely eliminated the microorganisms of the root canals. Castor oil and ginger significantly reduced the number of CFU of the tested bacteria. Reduction of CFU/mL at the 1st and 2nd collections for groups G1, G2, G3 and G4 was greater in comparison to groups G5 and G6. Conclusion: It was concluded that 2.5% sodium hypochlorite and 2% chlorhexidine gel were more effective in eliminating C. albicans and E. faecalis, followed by the castor oil and glycolic ginger extract. The Aloe vera extract showed no antimicrobial activity. .

Antifungal effect of plant extracts on Candida albicans biofilm on acrylic resin / Efeito antifúngico de extratos vegetais sobre biofilme de Candida albicans em resina acrílica

Objetivo: Avaliar potencial antifúngico dos extratos de Equisetum arvense L. (cavalinha), Glycyrrhiza glabra L. (alcaçuz), Punica granatum L. (romã) e Stryphnodendron barbati-mam Mart. (barbatimão) sobre biofilme de Candida albicans em resina acrílica. Material e métodos: Cepa-padrão de C. albicans foi cultivada em ágar Sabouraud-dextrose por 24 h a 37°C. Após padronização do inóculo (106 células/mL) em espectrofotômetro, foram mantidos em caldo Brain Heart Infusion suplementado comsacarose (5%) um disco de resina acrílica estéril com 100 μL do inóculo padronizado, por 5 dias a 37 °C. As amostras dos grupos tratados (n = 10) foram expostas separadamente à concentração de 50 mg/mL de cada extrato por 5 min e ao antifúngico nistatina (48.83 UI/mL). Para o grupo não tratado (controle, n = 10) foi utilizada solução fisiológica estéril (NaCl 0,9%). Os biofilmes foram desagregados dos discos de resina acrílica por homogeneizador ultrassônico por 30 s. Após diluições decimais, foram feitas semeaduras em placas de Sabouraud-dextrose e incubação por 48 h a 37 ºC. Posteriormente, foram contadas as UFC/mL e os valores foram convertidos em log10 e realizada análise estatística (ANOVA e Tukey Test; p ≤ 0,05). Resultados: Todos os extratos naturais e a nistatina proporcionaram reduções significativas (p < 0,01) do biofilme de C. albicans em comparação ao grupo controle (NaCl 0,9%), no entanto, não houve diferença estatística entre os extratos (p = 0,1567). Conclusões: Houve formação de biofilme de C. albicans em resina acrílica e todos os extratos vegetais foram efetivos para esta levedura, atuando semelhantemente à nistatina.

Objective: Evaluating the antifungal potential of Equisetum arvense L. (horsetail), Glycyrrhiza glabra L. (licorice), Punica granatum L. (pomegranate) and Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimão) extracts, after Candida albicans biofilm formation on acrylic resin. Material and methods: C. albicans standard strain was cultured on Sabourauddextrose agar for 24 h at 37 °C. After standardized in a spectrophotometer, 100 μL of the inoculums (106 cells/mL) and a sterile acrylic resin disc were maintained in Brain Heart Infusion broth supplemented with sucrose (5%), for 5 days at 37ºC. The samples of the treated groups (n = 10) were separately exposed to a concentration of 50 mg/mL of each extract for 5 minutes or to nystatin (48.83 IU/mL). For the untreated group (control, n = 10), it was used sterile saline (0.9% NaCl). Biofilms were disaggregated from the acrylic resin discs by an ultrasonic homogenizer for 30 s. After decimal dilutions, sowings in Sabouraud-dextrose plates were made with incubation for 48 h at 37°C. Later, CFU/mL was verified and the values were converted to log10 and they had their statistical analysis done (ANOVA and Tukey Test, p ≤ 0.05). Results: It was found that all plant extracts and nystatin resulted in significant reduction of C. albicans biofilm (p < 0.01) compared to the control group (0.9% NaCl). However, all of them showed similar reductions to each other (p = 0.1567). Conclusion: There was biofilm formation of C. albicans on acrylic resin and all plant extracts were effective against this yeast, acting similarly to nystatin.

Effect of Zingiber officinale and propolis on microorganisms and endotoxins in root canals

The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of glycolic propolis (PRO) and ginger (GIN) extracts, calcium hydroxide (CH), chlorhexidine (CLX) gel and their combinations as ICMs (ICMs) against Candida albicans,Enterococcus faecalis, Escherichia coli and endotoxins in root canals. Material and Methods: After 28 days of contamination with microorganisms, the canals were instrumented and then divided according to the ICM: CH+saline; CLX, CH+CLX, PRO, PRO+CH; GIN; GIN+CH; saline. The antimicrobial activity and quantification of endotoxins by the chromogenic test of Limulus amebocyte lysate were evaluated after contamination and instrumentation at 14 days of ICM application and 7 days after ICM removal. Results and Conclusion: After analysis of results and application of the Kruskal-Wallis and Dunn statistical tests at 5% significance level, it was concluded that all ICMs were able to eliminate the microorganisms in the root canals and reduce their amount of endotoxins; however, CH was more effective in neutralizing endotoxins and less effective against C. albicans and E. faecalis, requiring the use of medication combinations to obtain higher success.

Influence of artificial saliva in biofilm formation of Candida albicans in vitro

Due to the increase in life expectancy, new treatments have emerged which, although palliative, provide individuals with a better quality of life. Artificial saliva is a solution that contains substances that moisten a dry mouth, thus mimicking the role of saliva in lubricating the oral cavity and controlling the existing normal oral microbiota. This study aimed to assess the influence of commercially available artificial saliva on biofilm formation by Candida albicans. Artificial saliva I consists of carboxymethylcellulose, while artificial saliva II is composed of glucose oxidase, lactoferrin, lysozyme and lactoperoxidase. A control group used sterile distilled water. Microorganisms from the oral cavity were transferred to Sabouraud Dextrose Agar and incubated at 37°C for 24 hours. Colonies of Candida albicans were suspended in a sterile solution of NaCl 0.9%, and standardisation of the suspension to 106 cells/mL was achieved. The acrylic discs, immersed in artificial saliva and sterile distilled water, were placed in a 24-well plate containing 2 mL of Sabouraud Dextrose Broth plus 5% sucrose and 0.1 mL aliquot of the Candida albicans suspension. The plates were incubated at 37°C for 5 days, the discs were washed in 2 mL of 0.9% NaCl and placed into a tube containing 10 mL of 0.9% NaCl. After decimal dilutions, aliquots of 0.1 mL were seeded on Sabouraud Dextrose Agar and incubated at 37°C for 48 hours. Counts were reported as CFU/mL (Log10). A statistically significant reduction of 29.89% (1.45 CFU/mL) of Candida albicans was observed in saliva I when compared to saliva II (p = 0.002, considering p≤0.05).

In vitro evaluation of the action of irrigating solutions associated with intracanal medications on Escherichia coli and its endotoxin in root canals

OBJECTIVE: The purpose of this study was to evaluate the effcacy of auxiliary chemical substances and intracanal medications on Escherichia coli and its endotoxin in root canals. MATERIAL AND METHODS: Teeth were contaminated with a suspension of E. coli for 14 days and divided into 3 groups according to the auxiliary chemical substance used: G1) 2.5 percent sodium hypochlorite (NaOCl); G2) 2 percent chlorhexidine gel (CLX); G3) pyrogenfree solution. After, these groups were subdivided according to the intracanal medication (ICM): A) Calcium hydroxide paste (Calen®), B) polymyxin B, and C) Calcium hydroxide paste+2 percent CLX gel. For the control group (G4), pyrogen-free saline solution was used without application of intracanal medication. Samples of the root canal content were collected immediately after biomechanical preparation (BMP), at 7 days after BMP, after 14 days of intracanal medication activity, and 7 days after removal of intracanal medication. The following aspects were evaluated for all collections: a) antimicrobial activity; b) quantifcation of endotoxin by the Limulus Amebocyte Lysate test (LAL). Results were analyzed by the Kruskal-Wallis and Dunn's tests at 5 percent signifcance level. RESULTS: The 2.5 percent NaOCl and CLX were able to eliminate E. coli from root canal lumen and reduced the amount of endotoxin compared to saline. CONCLUSIONS: It was concluded that 2.5 percent NaOCl and CLX were effective in eliminating E. coli. Only the studied intracanal medications were to reduce the amount of endotoxin present in the root canals, regardless of the irrigant used.

Atividade antimicrobiana de enxaguatórios bucais sem álcool à base de clorexidina sobre Candida albicans / Antimicrobial activity of alcohol-free chlorhexidine mouthwashes on Candida albicans

A proposta deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana de enxaguatórios bucais, à base de clorexidina, sem álcool na sua composição, sobre Candida albicans. Foram avaliados vinte isolados clínicos de C. albicans e uma cepa de referência (ATCC 18804) frente a dois enxaguatórios à base de digluconato de clorexidina 0,12% e sem etanol ("Ca" e "Or"), em comparação ao enxaguatório de gluconato de clorexidina com etanol (controle positivo). A máxima diluição inibitória (MDI) e a máxima diluição fungicida (MDF) foram determinadas pelo método de microdiluição. Foram realizadas 12 diluições seriadas dos produtos (de 50 a 0,02%) em duplicata. Em seguida, foram acrescentados 100 µL da suspensão de C. albicans (106 células.mL-1) nos poços das placas. Após incubação (37 °C/24 horas), a MDI foi determinada por meio da leitura das densidades ópticas. Para determinar a MDF, foram realizadas semeaduras do conteúdo dos poços em ágar Sabouraud. Não houve diferenças estatísticas entre os grupos Or e controle para a MDI, mas o grupo Ca mostrou uma MDI estatisticamente maior (Kruskal-Wallis, p = 0,0012). Já para MDF, não houve diferenças estatísticas entre os grupos Ca e controle (Teste de Mann-Whitney, p = 0,1631). Pode-se concluir que o grupo Ca apresentou atividade fungicida sobre C. albicans semelhante ao controle, mas menor ação fungistática em comparação ao controle, enquanto que o Or apresentou apenas ação fungistática semelhante ao controle sobre os isolados avaliados.

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of alcohol-free mouthwashes on Candida albicans. Twenty clinical isolates of C. albicans and one reference strain (ATCC 18804) were evaluated after exposure to two 0.12% chlorhexidine-based and alcohol-free ("Ca" and "Or") in comparison to gluconate chlorhexidine with ethanol (positive control). The maximum inhibitory dilution (MID) and maximum fugal dilution (MFD) were determined by the microdilution method. Twelve serial dilutions (from 50 to 0.02%) were prepared in duplicate. Then, 100 µL of C. albicans suspension (106 cells.mL-1) were added to the wells. After incubation (37 °C/24 hours), MID was determined by reading the optical density. For MFD determination, the content of the wells were plated on Saouraud agar. For MID, there were no differences between groups Or and control, but Ca group showed a MID statistically higher (Kruskal-Wallis, p = 0.0012). For MFD, there were no differences between Ca and control (Mann-Whitney test, p = 0.1631). It can be concluded that Ca group showed a fungicid activity against C. albicans similar to the control, but lower fungistatic activity when compared to the control. Group Or showed only a fungistatic action similar to control.